乳酸脱氢酶（LDH）作为一种关键的氧化还原酶，发挥着在丙酮酸和乳酸之间的相互转化以及NADH与NAD+的互换作用。LDH在各类细胞中均具有稳定性，当细胞膜受到损伤时，它会迅速释放到培养基中。这使得LDH成为细胞毒性研究中广泛使用的标记物之一。

采用细胞毒性检测试剂盒（LDH法），可以有效进行细胞毒性的比色定量分析。此法的基本原理是：在细胞毒性实验中，将靶细胞与细胞毒性化学剂或细胞（如自然杀伤细胞或细胞毒性T细胞）共同培养，从而诱导靶细胞死亡，并释放LDH。随后，将含有LDH的上清液转移至新的96孔板中，并与LDH反应溶液混合。在LDH的催化下，NADH与MTT反应，生成更为稳定的还原形式，该形式在565nm波长下呈现最强吸收，其强度与裂解细胞的数量成正比。经过在室温下孵育30分钟后，使用酶标仪读取565nm处的光吸收值。

实验步骤详解：

1. 需要确认所用药物是否适合该试剂盒。部分药物可能干扰反应，因此建议先进行预实验，若有抑制作用，请联系尊龙凯时技术支持。

2. 在96孔板中接种已培养超过24小时的细胞，离心后去除颗粒，以得到纯净的细胞上清。

3. 每孔加入200μL细胞培养上清，并设置6个复孔。

4. 在3个孔中加入20μL目标药物，另一组3孔加入20μL实验缓冲液作为对照。

5. 每孔各取100μL样品转移至新的96孔检测板中。

6. 向每孔中加入100μL LDH反应液。

7. 将板在37℃条件下孵育最多30分钟。

8. 用酶标仪读取565nm处的吸光度，计算吸光度值，判断药物的细胞毒性。

在实验过程中请务必保持良好的实验习惯，穿戴好手套、实验服及必要的保护装备。同时，从不同批次或不同厂家中获得的试剂请勿混用，以避免不必要的错误。

通过上述步骤，您将能够高效地评估细胞毒性，并借助尊龙凯时的相关产品来保证测定的准确性和可靠性。优化您的细胞研究，确保研究结果的有效与科学。